養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴們都知道，細(xì)胞一定要傳代，因?yàn)榧?xì)胞在培養(yǎng)過程中不斷的繁殖，數(shù)量也隨之增加，然而培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶的空間有限，增殖受到抑制，所以必須將一部分細(xì)胞移至別的培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶，讓細(xì)胞有足夠生長(zhǎng)空間。  
細(xì)胞傳代也不僅僅是為細(xì)胞安一個(gè)更大的“家"，更重要的，是使細(xì)胞系或細(xì)胞株進(jìn)一步增殖，這樣，我們才能有足夠的細(xì)胞做各種各樣的實(shí)驗(yàn)。  
但是，對(duì)于傳代的時(shí)間，很多小伙伴都掌握不好，因?yàn)閷?duì)于不同的細(xì)胞來說，判斷能否開始傳代的標(biāo)準(zhǔn)略有不同，今天，我們就主要來聊一下，細(xì)胞傳代的時(shí)間問題。  
什么時(shí)候進(jìn)行細(xì)胞傳代?  
對(duì)于貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)而言，判斷是否需要傳代主要看以下2個(gè)方面：  
•細(xì)胞密度：  
貼壁培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)即應(yīng)進(jìn)行傳代，正常細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)會(huì)停止生長(zhǎng)(接觸抑制)，重新接種后需要較長(zhǎng)時(shí)間才能恢復(fù)，轉(zhuǎn)化細(xì)胞即使達(dá)到匯合狀態(tài)也能繼續(xù)增殖，但是在經(jīng)過大約兩個(gè)倍增時(shí)間后通常會(huì)變質(zhì)。類似地，  
懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)也應(yīng)進(jìn)行傳代。達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)聚集成團(tuán)塊，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶時(shí)培養(yǎng)基會(huì)變得渾濁。  
•培養(yǎng)基耗竭：  
生長(zhǎng)培養(yǎng)基pH值降低通常表示乳酸蓄積，乳酸是細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物。乳酸有細(xì)胞毒性，而且pH值降低也是細(xì)胞生長(zhǎng)的不利因素。pH值改變的速度通常取決于培養(yǎng)體系中的細(xì)胞濃度，細(xì)胞濃度越高，培養(yǎng)基耗竭的速度越快。  
如果發(fā)現(xiàn)pH值迅速降低(>0.1–0.2pH單位)，同時(shí)細(xì)胞濃度增大，則應(yīng)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代。

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